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分子诊断学(本医学检验)

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试论述一个完整的PCR反应体系的组成成分有哪些?各组分在PCR反应中的作用是什么?

正确答案:主要包括模板、引物、dNTP, Tag DNA聚合酶和缓冲液等成分。模板为要复制的核酸 片段(靶核酸)。模板DNA的纯度、结构和数量是影响PCR的重要因素。反应体系中较低 量的模板有利于提{扩增产量和减少非特异性扩增。引物为化学合成的两条寡核苷酸,决 定PCR产物的特异性。浓度过高容易生成引物二聚体或非特异性产物。脱氧核苷三磷酸 (dNTPs)为dATP、dCTP、dGTP和dTTP四种脱氧核苷三磷酸的混合物。反应体系中四种核 苷酸的浓度必须一致,以免增加反应错配率。浓度过高可使非特异性扩增增加,降低dN
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