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分子诊断学(本医学检验)

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DHPLC技术的基本原理是什么?实际工作中如何保证DHPLC技术检测的准确性?

正确答案:1,样品要求;PCR产物片段大小应在200-500bp范围,优化PCR产物以排除干扰物质的影响,样品含量要足够大以保证电泳结果的可靠性。2,检测条件优化:设计最佳引物扩增长度为200-500bp且只有一个融解区域,无错配的PCR片段,优化PCR反应体系,控制好温度的时间达到模板双链完全变性,复性,DHPLC检测上样前要验证PCR产物质量,以保证结果的准确性。3.结果分析:在部分变性条件下出现异源双链峰,表明存在异质性突变位点,反之则为同源的单峰。建议实验室建立阳性质控品。
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