凝胶层析的应用主要有哪些?并说明其原理。(章节:第七章 难度:4)
正确答案:当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时,较小的分子在柱中停留时间比大分子停留的时间要长,于是样品各组分即按分子大小顺序而分开,最先淋出的是最大的分子(2分)。
应用:
一、脱盐:脱盐用的凝胶多为大粒度的,高交联度的凝胶。此时溶液中蛋白质等大分子的Kd=0,盐类的Kd=1。由于交联度大,凝胶颗粒的强度较好,加之凝胶粒度大,柱层操作比较便利,流速也高。
二、分子量测定:对于一个特定体系(凝胶柱),待测定物质的洗脱体积与分子量的关系符合公式
Ve=-KlogM+C
先以3个以上(最好更多些)的已知分子量
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