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临床生物化学与检验(专医学检验)

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比较血清肌酐测定的两种方法(Jaffc法和酶法)的优缺点。

正确答案:Jaffe反应法(苦味酸法):肌酐与碱性苦味酸发生Jaffe反应,生成橘红色的苦味酸肌酐复合物,在510?520nm波长附近测定吸光度。橘红色化合物的生成量与肌酐含量成正比,通过与同样处理的肌酐标准液比较,即可求出样本中肌酐含量。本实验方法特异性不高,维生素C、丙酮酸、葡萄糖、乙酰乙酸、丙酮、胍类、蛋白质等均能与苦味酸反应生成红色化合物(假肌酐)。酶法:血肌酐经肌酐水合酶催化生成肌酸,肌酸与肌酸激酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶耦联反应,使NADH变成NAD+,在波长340nm处吸光度(NADH吸收峰)值降低,其降低程度与血肌酐含量成正比。该方法特异性高,适用于手工及自动生化分析仪测定。亦可采用肌酐酰胺水解酶-肌酸酶-肌氨酸氧化酶-过氧化物酶耦联法,利用Trinder反应产生的醌亚胺类物质颜色深浅反映出肌酐浓度高低。肌酐亚氨水解酶法利用肌酐亚氨水解酶水解肌酐生成N-甲基乙内酰脲和氨,再用电极法测氨,准确性好,特异性高,但易受内源性氨干扰。
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