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毕业综合考试(专医学检验)

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何为免疫印迹法,其基本原理、方法及临床应用如何?(章节:第四章 难度:4)

正确答案:免疫印迹法亦称酶联免疫电转移印斑法,亦称为Westernblot。免疫印迹法是由十二烷基磺酸钠一聚苯烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),蛋白质转运和酶免疫测定三项技术结合而成。其基本原理是蛋白质样品经SDS-PAGE,其中的抗原按分子量及带电荷量大小不同而被分离,通过转移电泳原位转印至固相介质(如NC)上,并保持生物学活性,然后用酶免疫测定进行特异性检测。其方法分三阶段进行:首先抗原等蛋白质样品经SDS处理后带负电荷,在聚丙烯酰胺凝胶电泳时从阴极向阳极泳动,分子量小者,泳动速度快。然后将凝胶中已经分离的蛋
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