1．患者侧卧于硬板床上，背部与床面垂直，头向前胸部屈曲，两手抱膝紧贴腹部，使躯干呈弓形。或由助手立于术者对面，用一手搂住患者头部，另一手搂住双下肢胭窝处并用力抱紧，使脊柱尽量后突，以增加椎间隙宽度，便于进针。

2．以髂后上棘连线与后正中线交会处为穿刺点通常取第3～4腰椎棘突间隙，也可在上一个或下一个椎间隙进行。

3．常规消毒皮肤，以穿刺点为中心，消毒直径约15cm，戴无菌手套、铺消毒洞中，以2％利多卡因自皮肤至椎间韧带作局部浸润麻醉。

4．术者以左手拇、示二指固定穿刺点皮肤，右手持穿刺针以垂直背部方向缓慢刺入，当针头穿过韧带与硬脊膜时，可感到阻力突然消失(成人进针深度为4～6cm，儿童为2～4cm)，此时将针芯缓慢拔出，即可见无色透明脑脊液流出。

5．当见到脑脊液即将流出时，需防止脑脊液流出过快造成脑疝。接上测压管测量压力，准确读数，亦可计数脑脊液滴数估计压力(正常为70～ 80mmH₂O或40～ 50滴／分)。放液前先接上测压管，嘱患者慢慢伸直双腿，然后测量脑脊液压力。若压力不高，可令助手压迫一侧颈静脉约10s，然后再压另一侧，最后同时按压双侧颈静脉，若脑脊液压力迅速升高一倍左右，解除压迫后10～20s，又迅速降至原来水平，表示蛛网膜下腔通畅，若压迫静脉后压力不升高，表示蛛网膜下腔完全阻塞，若压迫后压力缓慢上升，放松后又缓慢下降，表示不完全阻塞。

6．撤除测压管，收集脑脊液2～5ml，送验常规、生化，如需送细菌培养，应用无菌操作法留标本。

7．如作脑膜白血病治疗，通常以4生理盐水稀释甲氨蝶呤(MTX)10mg，加地塞米 松5mg，缓慢椎管内注射，边推边回抽，用脑脊液不断稀释药物浓度，通常在10min内注射完毕。

8．术毕将针芯插入后一起拔出穿刺针，覆盖消毒纱布，胶布固定。

9．术后去枕仰卧4～6h，可避免术后低颅压性头痛。