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医学临床三基(医技)

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简述乳酸脱氢酶测定原理及注意事项。

正确答案:乳酸脱氢酶(LDH)在辅酶Ⅰ的递氢作用下,使乳酸脱氢而生成丙酮酸。 L-乳酸+NAD[~+.gif]丙酮酸+NADH+H[~+.gif] NAD[~+.gif]还原成NADH,引起340nm处吸光度的改变,其吸光度的增加速率与标本中LDH浓度成正比。此法适应全自动生化仪连续监测。如果无条件连续监测,可在反应后加入2,4-二硝基苯肼,与丙酮酸反应生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性环境中显棕红色。根据颜色深浅计算酶活力大小。 注意事项:①草酸、乙二胺四乙酸对本酶有抑制作用,故不适合使用。②红细胞中乳酸脱氢酶含量较血清中约高100倍,故应避免溶血,并及时分离血清。
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