血液葡萄糖测定
正确答案:[方法]
手工分光光度计比色法。
[操作]
1．分离血浆或血清。标本收集采用加入氟化钠的血糖专用采血管，离心分离血浆。也可采用普通生化管收集血清，但必须尽快分离血清。
2．分别吸取标本和标准液，加入试剂，充分混匀后37℃保温一定时间。
3．将分光光度计波长调至505nm，用蒸馏水调0，分别测定标准管和待测管吸光度值。
4．计算：
待测标本血糖=(待测管吸光度值/标准管吸光度值)×标准液浓度
[注意事项]
1．应尽快分离血浆(或血清)，时间延长将导致血糖降低。
2．用离心机应该按照操作规程进行操作。
3．取样品和试剂时，应右手持吸量管，左手握洗耳球。吸样后应用洁净的纱布或卫生纸擦去吸量管外壁的多余液体。
4．读数时，视线应与吸量管内液体凹面在同一水平面。
5．排液时应使吸量管和试管内壁成45°角接触，慢慢将液体放至试管中，最后在管壁停留15秒。
6．分光光度计的使用应严格按仪器操作规程进行操作。
7．使用比色杯时，应手持比色杯两侧的毛玻璃面，用软布将透光面擦干净。加比色液时，不得让液体溢出比色杯。
8．试剂和标准液使用完后应及时存入冰箱，使用时应平衡至室温方可使用。
[提问]
1．使用吸量管时应注意些什么?
(1)右手持吸量管，左手握洗耳球。吸样后应用洁净的纱布或卫生纸擦去吸量管外壁多余液体。
(2)读数时，视线应与吸量管内液体凹面在同一水平面。
(3)排液时应使吸量管和试管内壁成45°角接触，慢慢将液体放至试管中，最后在管壁停留15秒。
(4)如吸量管上刻有“吹“字，则应吹出管尖残留液体。
2．使用离心机时应注意些什么?
(1)认真阅读使用说明书，严格按说明书操作。
(2)离心时应注意离心管的平衡。
(3)停止时应让其自然停止，切不可用手强行停止。
3．使用分光光度计时应注意些什么?
(1)认真阅读使用说明书，严格按说明书操作。
(2)使用前应开机预热20分钟方可使用。
(3)使用时应将波长准确调至所需波长。
(4)以蒸馏水或试剂空白调0，分别测定标准品和待测管的吸光度。
(5)使用比色杯时应手持比色杯两侧的毛玻璃面，用软布将透光面擦干净。加比色液时，不得让液体溢出比色杯。
4．标本管为什么要使用加入了氟化钠的抗凝管?标本为什么要尽快分离?
血细胞离体后仍能存活一段时间，需要不断地从血浆中摄取葡萄糖进行无氧酵解，因此血液离体后血浆中的葡萄糖以每小时6％～7％的速度下降。加入氟化钠可以抑制红细胞的烯醇化酶，抑制红细胞的无氧酵解，降低血糖的下降速度。
5．简述葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法测定葡萄糖的原理。
(1)葡萄糖氧化酶法测定原理：
在505nm波长下测定吸光度的变化。
(2)己糖激酶法测定原理：
在340nm检测NADPH吸光度的变化。
在505nm波长下测定吸光度的变化。
(2)己糖激酶法测定原理：
在340nm检测NADPH吸光度的变化。
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