简述HPLC分析时。固定相及流动相的选择。

正确答案:答：根据被分离物质的化学结构、极性和溶解度等因素来选择固定相及流动相，应用HPLC法进行中药制剂有效成分含量测定时，一般都使用商品柱，大多数药物可用C(ODS)反相柱进行分离测定，因此建立分析方法时，可先试用C柱反相柱，不行再改用其他柱，可按以下原则进行：①弱极性、中等极性组分，选择C或C反相柱，流动相采用醇-水系列，通过调节醇一水比例控制保留值及分离选择性；②对具有酸碱性质、或具有离解性的物质，仍用C反相柱，可在流动相中加入缓冲液，抑制解离，或加入离子对试剂使之形成中性离子对化合物，采用离子抑制色谱或离子对色谱的方法测定；③对于极性较大物质，一般采用氨基、氰基等正相柱，以正己烷一异丙醇混合溶剂系统分离测定(也可以TLC为先导摸索合适流动相)。