什么是2-DE,简述2-DE的基本原理。 ( 难度:4 )
正确答案:2-DE:二维凝胶电泳。由两向电泳组成,第一向是以蛋白质电荷差异为基础进行分离的等电聚焦凝胶电泳,第二向是以蛋白质相对分子质量差异为基础的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。基本原理:等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的净电荷或等电点进行分离的技术。在等电聚焦过程中,所采用的载体两性电解质可在电场中形成正极为酸性、负极为碱性的连续的pH梯度。当蛋白质迁移到其等电点位置时,净电荷为零,在电场中不再移动,从而将不同等电点性质的蛋白质分离开来。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳:SDS能与蛋白质的疏水部分结合,从而使蛋白质获得负电荷,屏蔽了没有SDS时正常存在的任何一种电荷,使得电泳时,电泳迁移率仅与分子大小有关,使不同相对分子质量的蛋白质得以分离。
答案解析:有
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